熒光光譜儀又稱(chēng)熒光分光光度計(jì),是一種定性、定量分析的儀器。其工作原理基于熒光現(xiàn)象。光源發(fā)出的紫外光經(jīng)過(guò)單色器得到具有特定波長(zhǎng)的激發(fā)光,該激發(fā)光照射到樣品上。物質(zhì)在吸收激發(fā)光的過(guò)程中,光子的能量傳遞給物質(zhì)分子,使其從較低能級(jí)躍遷到較高能級(jí)。處于激發(fā)態(tài)的分子不穩(wěn)定,會(huì)通過(guò)輻射躍遷和非輻射躍遷過(guò)程返回基態(tài),并發(fā)出熒光。這些熒光經(jīng)過(guò)第二單色器(熒光單色器)選擇后,被檢測(cè)器接收并轉(zhuǎn)換為電信號(hào),最后經(jīng)放大并記錄顯示。
1、高精度與高靈敏度:利用熒光光譜儀可以準(zhǔn)確地測(cè)量熒光物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的激發(fā)和發(fā)射光譜。該設(shè)備能夠探測(cè)非常微弱的光信號(hào),因此具有高的靈敏度。
2、光源:通常采用強(qiáng)度高、穩(wěn)定性好的連續(xù)光源,如氙燈或激光器,以確保對(duì)樣品的充分激發(fā)。
3、單色器:設(shè)備中包含兩個(gè)單色器,一個(gè)用于選擇激發(fā)光的波長(zhǎng),一個(gè)用于分離和選擇熒光發(fā)射的波長(zhǎng)。這些單色器可能是光柵或?yàn)V光片,確保了良好的單色性和分光精度。
4、樣品池設(shè)計(jì):樣品池用于容納熒光物質(zhì),通過(guò)精心設(shè)計(jì)以降低入射光的影響并提高信號(hào)收集效率。
5、檢測(cè)系統(tǒng):檢測(cè)單元通常使用光電倍增管(PMT),它可以將接收到的熒光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào),進(jìn)而被記錄和分析。
6、結(jié)構(gòu)組成:除了上述核心組件外,熒光光譜儀還包含快門(mén)單元、偏振片單元等,這些可以根據(jù)測(cè)試需求選擇性使用來(lái)獲得不同的熒光信息。
7、廣泛應(yīng)用范圍:在化學(xué)、環(huán)境和生物化學(xué)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,尤其是研究小分子和生物大分子相互作用時(shí)提供了重要的信息。